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 Tema Central - nov/dic 2004
continuación: Los procesos requieren de ajustes finos
Duración del análisis
Las reglas para análisis de semillas indican, para el análisis de germinación, dos conteos de plantas normales. Tomemos como ejemplo el análisis de germinación de semillas de soja. Los conteos son realizados en el quinto y en el octavo día. Si el análisis es iniciado un día miércoles por ejemplo, el primer conteo será realizado el próximo día lunes y el conteo final el día jueves. No existe una indicación de horario específico para la realización de estos conteos, por lo que podrán ser realizados tanto a las ocho de la mañana como a las cinco de la tarde del día indicado.
En los análisis de vigor, donde las semillas son sometidas a un estrés previo, o en el cual se evalúa la velocidad de crecimiento de las plántulas, esa variación de horas es inaceptable, pues las reacciones metabólicas ocurren en un período de tiempo muy corto, teniendo reflejos significativos en la expresión del vigor de las plantas. Para el análisis de envejecimiento acelerado, en el cual las semillas son expuestas a alta temperatura durante 72 horas, la observación del tiempo es de fundamental importancia para la obtención de resultados precisos, pues la reducción o el aumento en el tiempo de exposición tendrá reflejos en una mayor o menor germinación de las semillas, llevando a la obtención de resultados no representativos. La observación rigurosa del tiempo de exposición también es exigida para otros análisis, como el de conductividad eléctrica. Semillas más deterioradas lixivian más en menor tiempo que semillas vigorosas. Normalmente, 16 horas de imbibición son suficientes para que la lixiviación se complete. No obstante, semillas vigorosas habrán completado el proceso de lixiviación solamente después de las 24 horas de imbibición.
El tiempo indicado para la realización del análisis de conductividad eléctrica es de 24 horas. Si la medición de la conductividad fuera realizada a las 23 o a las 25 horas los resultados obtenidos no serán precisos, pues las semillas habrán lixiviado menos o más que a las 24 horas. Con respecto a este análisis otras dos observaciones son importantes de realizar. Una es relacionada con la temperatura y la otra con el número de muestras que serán analizadas. La lixiviación de electrolitos es mayor a 25ºC que a 20ºC. Por eso el análisis debe ser realizado en un ambiente con temperatura controlada. No debemos analizar un número excesivo de muestras, pues el tiempo necesario para la medición puede conducir a la obtención de resultados irreales, en función del prolongado tiempo de imbibición.
Dosificación de los productos
Para la evaluación de la calidad de las semillas, normalmente son utilizados diferentes tipos de productos químicos, como sales y ácidos, especialmente para superar la dormición y obtener una germinación más rápida y uniforme. La concentración de estos productos debe ser rigurosamente observada, ya que cualquier error en la formulación de la concentración indicada podrá causar la muerte de las semillas o efectos indeseados, comprometiendo de esta forma el análisis. La escarificación ácida, utilizada para superar la dormición de algunas especies de gramíneas, como también para la remoción del linter de las semillas de algodón, es un ejemplo de una práctica que debe ser realizada con mucho cuidado. La exposición de las semillas a concentraciones muy altas o la inmersión por un excesivo período de tiempo, invariablemente causara la muerte de las mismas o la aparición de plantas anormales, comprometiendo la precisión del análisis de germinación.
Equipamientos
Los análisis de germinación y de estrés de semillas son influenciados por la temperatura. Consecuentemente, el equipamiento que será utilizado para la conducción del análisis deberá tener un sistema de calentamiento y control de temperatura que permita la obtención y mantenimiento de la temperatura deseada, de forma que la oscilación de la temperatura se mantenga dentro de niveles aceptables. Si la metodología de un determinado análisis indica la exposición de las semillas a una temperatura de 30°C, el equipamiento deberá ser capaz de alcanzar y mantener esta temperatura constante durante todo el período de conducción del análisis. Ésta temperatura no podrá ser ni 29°C ni 31°C. Las variaciones de temperatura durante la ejecución del análisis podrán ser minimizadas controlando la temperatura ambiente o mediante el empleo de termostatos electrónicos, más sensibles a las variaciones térmicas. También es importante que el laboratorio confirme si la temperatura programada de un equipamiento está correcta. Para eso deben ser realizados controles frecuentes con la utilización de termómetros calibrados.
Asepsia
Los resultados de un análisis en el cual se evalúa la capacidad de germinación de las semillas es muy influenciado por la presencia de microorganismos contaminantes, especialmente hongos, ya sea sobre substrato de papel, suelo o arena. Entre los principales hongos contaminantes se destaca la presencia de Rhizopus spp. y Mucor spp, los cuales pueden estar localizados en las semillas, especialmente en semillas viejas, como así también en el propio substrato. En algunos casos el crecimiento de estos contaminantes es tan grande que llega a impedir el desarrollo normal de las plantas. En una situación de este tipo se debe identificar la fuente de contaminación y buscar alternativas. En el caso de que el problema sea en el substrato será necesario repetir el análisis realizando previamente la esterilización del mismo.
La asepsia del ambiente de trabajo también es fundamental. Las paredes, el techo, mesas de trabajo, etc., puede ser debidamente esterilizadas con una solución de hipoclorito de sodio 1%. De la misma forma no debe ser ignorada la asepsia de los germinadores y cámaras empleadas para la incubación de las semillas.
Para la asepsia de un germinador también pueden ser utilizados productos químicos gaseosos, como el formol. Las paredes internas del germinador deben ser lavadas con una solución de formalina al 4%, cerrando enseguida la puerta y ajustando la temperatura para 25°C, dejándolo así durante toda una noche. En el día siguiente se abre la puerta y se deja salir el gas para posteriormente colocar el material que va a ser incubado. Los detergentes como el jabón por ejemplo, actúan por remoción mecánica, reduciendo la tensión superficial y aumentando el poder humectante el agua. Los microorganismos y partículas contaminantes se adhieren a la espuma y son así removidos con el agua durante el enjuague.
Estos cuidados son importantes para evitar el desarrollo de hongos contaminantes y facilitar la evaluación de las plantas.
Experiencia
La precisión de los resultados de un análisis depende también de la habilidad del analista. La capacidad de realizar un análisis está directamente relacionada con el grado de entrenamiento del analista. El entrenamiento en servicio es importante para la obtención de experiencia. No obstante, la precisión necesaria para la realización de análisis laboratoriales es conseguida por medio de entrenamientos específicos. La participación en análisis de referencia es otro mecanismo que contribuye para la formación de los laboratoristas y para el mantenimiento de la excelencia de los servicios prestados.
Siendo que la calidad es un requisito esencialmente asociado a la competitividad de una empresa y a la excelencia de los productos por ella ofertados, ésta no puede ignorar procesos que deben ser conducidos de forma precisa para ofrecer a sus clientes un producto o servicio diferenciado de los demás. Así, un laboratorio de análisis de semillas debe primar por la utilización correcta de los métodos y equipamientos necesarios para la conducción de los análisis, debiendo los mismos ser realizados por técnicos entrenados y cualificados para tal fin.
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